Immunohistochimie : principe, déroulement au laboratoire et limites

L’immunohistochimie est une technique de laboratoire dans laquelle des anticorps sont appliqués à des coupes de tissu afin de produire une coloration révélant leur liaison à des éléments ciblés. [2] Elle peut notamment servir à étudier la présence ou la forme de certaines protéines dans des tissus tumoraux ou non tumoraux. [2] Dans un projet consacré au cancer du sein, des pathologistes évaluent par exemple sur des lames d’immunohistochimie les marqueurs RO, RP et Ki67. [1]

Comment la coloration est-elle réalisée au laboratoire ?

Dans le protocole consacré à la protéine MUC21, les tissus sont conservés dans du formol tamponné, inclus dans de la paraffine, découpés en fines sections, déposés sur des lames puis déparaffinés. [2] Les lames font ensuite l’objet d’étapes destinées à limiter les réactions non spécifiques avant l’application de l’anticorps dirigé contre la cible recherchée. [2] Un anticorps secondaire et un système de révélation permettent alors de rendre visible la liaison de l’anticorps sur la coupe de tissu. [2] Le protocole utilisant des anticorps monoclonaux contre différentes formes de MUC21 prévoit également une contre-coloration à l’hématoxyline après la révélation. [2]

Que peut montrer une immunohistochimie ?

La coloration peut aider à repérer des formes différentes d’une même molécule lorsque les anticorps employés reconnaissent des caractéristiques distinctes. [2] Dans les travaux sur MUC21, des anticorps ont ainsi été utilisés pour identifier des glycoformes produites différemment par des cellules épithéliales selon leur différenciation ou leur état pathologique. [2] Pour le projet de recherche sur le cancer du sein, les pathologistes comparent l’évaluation des marqueurs RO, RP et Ki67 sur des lames numérisées avec ou sans l’aide d’un logiciel d’intelligence artificielle. [1]

Pourquoi l’interprétation doit-elle rester prudente ?

La signification d’une coloration dépend notamment des caractéristiques de l’anticorps utilisé. [2] Les anticorps polyclonaux constituent un mélange d’anticorps ayant des spécificités différentes, dont certains peuvent réagir avec des antigènes sans rapport avec la cible recherchée. [2] Dans le cas de MUC21, les auteurs indiquent que les spécificités de liaison de certains anticorps ne sont pas encore définies avec précision et recommandent donc une interprétation prudente de la coloration. [2] Ces limites propres à un anticorps ou à une cible ne permettent pas, à elles seules, de conclure sur la fiabilité de toutes les analyses d’immunohistochimie. [2]