Test ELISpot : principe et application étudiée dans la tuberculose pulmonaire

L’ELISpot, ou enzyme-linked immunospot assay, est une technique de laboratoire qui peut être employée pour détecter la réponse de cellules immunitaires après leur exposition à des antigènes déterminés. [1] Dans l’application à la tuberculose décrite ici, le test mesure la sécrétion d’interféron gamma par des lymphocytes exposés à deux antigènes spécifiques de Mycobacterium tuberculosis, ESAT-6 et CFP-10. [1] Les données disponibles portent principalement sur une utilisation particulière réalisée à partir d’un liquide de lavage bronchoalvéolaire chez des personnes évaluées pour une tuberculose pulmonaire, et non sur tous les usages possibles de la technique ELISpot. [1]

Que mesure l’ELISpot dans la recherche d’une tuberculose ?

L’ELISpot utilisé dans ce contexte appartient aux tests de libération de l’interféron gamma, également appelés IGRA. [1] Après stimulation par les antigènes ESAT-6 et CFP-10, la technique détecte les cellules qui sécrètent de l’interféron gamma sous forme de points, ou spots. [1] Le test ELISpot se distingue de la méthode ELISA utilisée par d’autres IGRA, même si les deux approches évaluent la libération d’interféron gamma après stimulation des lymphocytes par des antigènes de Mycobacterium tuberculosis. [1]

Pourquoi le test a-t-il été étudié dans le liquide pulmonaire ?

L’utilisation du liquide de lavage bronchoalvéolaire a été étudiée parce que les lymphocytes reconnaissant Mycobacterium tuberculosis peuvent être davantage concentrés dans les poumons, qui constituent le site de l’infection pulmonaire. [1] Cette approche a notamment été évaluée chez des patients dont l’examen microscopique des sécrétions respiratoires ne mettait pas en évidence de bacilles acido-alcoolo-résistants. [1] Le prélèvement de liquide de lavage bronchoalvéolaire est toutefois invasif, comporte des risques et augmente le coût de cette stratégie, ce qui limite son adéquation à tous les patients et à tous les contextes. [1]

Comment interpréter les résultats étudiés ?

Dans les sept études réunies par la méta-analyse, la sensibilité du test ELISpot sur lavage bronchoalvéolaire variait de 0,73 à 1,00, avec une estimation groupée de 0,90. [1] La spécificité variait de 0,48 à 1,00, avec une estimation groupée de 0,80. [1] Ces performances variaient entre les études, avec une hétérogénéité significative pour plusieurs mesures de précision diagnostique. [1] La fréquence des résultats indéterminés et l’inclusion de patients vivant avec le VIH contribuaient à cette hétérogénéité. [1]

Un résultat suffit-il à diagnostiquer ou exclure une tuberculose pulmonaire ?

Selon les auteurs de la méta-analyse, l’ELISpot sur lavage bronchoalvéolaire peut contribuer au diagnostic d’une tuberculose pulmonaire, mais il n’est pas assez précis pour confirmer ou exclure à lui seul la maladie. [1] La culture de Mycobacterium tuberculosis restait l’examen de référence dans les études analysées, bien qu’elle demande plusieurs semaines et puisse elle-même ne pas détecter certains cas. [1] Les auteurs concluaient qu’aucune méthode microbiologique ou immunologique disponible ne suffisait isolément pour diagnostiquer ou écarter une tuberculose pulmonaire. [1] Un résultat ELISpot doit donc être considéré comme un élément complémentaire de l’évaluation diagnostique décrite dans cette étude, et non comme une réponse autonome. [1]

Quelles sont les limites des connaissances disponibles ?

La méta-analyse ne regroupait que sept publications, avec des effectifs limités et une qualité méthodologique jugée modeste en raison d’informations insuffisamment rapportées. [1] Les auteurs estimaient que des études plus vastes étaient nécessaires pour confirmer la valeur diagnostique du test, notamment chez les personnes vivant avec le VIH. [1] Ces résultats anciens et centrés sur le lavage bronchoalvéolaire ne décrivent pas la place actuelle de l’ensemble des tests ELISpot dans le parcours de soins en France. [1]