Immunophénotypage : principe et rôle de la cytométrie en flux

L’immunophénotypage est une technique qui utilise l’expression d’antigènes pour identifier différentes populations de cellules immunitaires et préciser leur état d’activation. [2] La méthode la plus couramment employée est la cytométrie en flux multicolore, qui étudie simultanément plusieurs caractéristiques des cellules. [2] L’immunophénotypage est un examen de laboratoire et non une maladie : il ne provoque donc pas lui-même de signes ou de symptômes. [1] [2]

Que recherche l’immunophénotypage ?

L’examen permet de distinguer des sous-populations de cellules immunitaires à partir des antigènes qu’elles expriment. [2] Selon le panel utilisé, il peut notamment différencier plusieurs catégories de lymphocytes B et T, de monocytes, de cellules dendritiques et de cellules natural killer. [2] Cette analyse peut détecter de faibles variations dans la composition des populations cellulaires. [2]

Comment la cytométrie en flux identifie-t-elle les cellules ?

La cytométrie en flux multiparamétrique repose sur des panels composés de plusieurs anticorps associés à des fluorophores, c’est-à-dire à des marqueurs fluorescents. [1] [2] Chaque panel est construit pour étudier un ensemble déterminé de populations cellulaires ou de marqueurs d’activation. [2] La diversité et la complexité des profils cellulaires pouvant être analysés dépendent notamment des capacités du cytomètre disponible. [2]

Quel est son rôle en hématologie ?

En hématologie, l’immunophénotypage par cytométrie en flux constitue un outil important pour le diagnostic, la classification et le suivi des syndromes lymphoprolifératifs chroniques. [1] Les syndromes lymphoprolifératifs chroniques constituent toutefois un contexte particulier d’utilisation et ne résument pas l’ensemble des applications de l’immunophénotypage. [1] [2]

Pourquoi les panels et les contrôles techniques comptent-ils ?

Le choix des anticorps intégrés aux panels peut varier entre les laboratoires, même lorsqu’il s’inspire de propositions publiées. [1] L’enquête menée auprès de 40 centres francophones a ainsi relevé des différences dans la composition des panels et dans la présentation des résultats. [1] Les membres interrogés souhaitaient majoritairement une harmonisation des panels ainsi que des échanges et des contrôles entre laboratoires. [1] Sur le plan technique, l’étalonnage de l’appareil, la qualification des réactifs et les contrôles de fluorescence servent à optimiser les anticorps fluorescents et à corriger les interactions entre leurs signaux. [2]